实时荧光定量PCR原理及滤镜应用

2020-03-11 11:00:42 @CJ-NMOT 267

实时荧光定量又称为Real-time qPCR是指在PCR反应中加入荧光基团,通过连续监测荧光信号出现的先后顺序以及信号强弱的变化,随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图,该技术的发明实现了PCR从定性到定量的飞跃。

实时荧光定量PCR其涉及领域包括:临床疾病诊断、动物检验检疫、食品安全和科学研究等。

在新型冠状病毒核酸、肝炎、艾滋病、流感、登革热、感染性腹泻等的检测、诊断和治疗上发挥着重要作用。

实时荧光定量PCR滤镜

与传统PCR相比,实时荧光定量PCR有着以下优点:

1.检测结果既可以定性,也可以定量;

2.检测灵敏度高;

3.无需进行凝胶电泳实验,节省实验时间,提高了效率。

实时荧光定量PCR测量采用荧光显微镜,其中是由激发滤镜、二向分色镜以及发射滤镜核心光学部件组成的,主要是用来匹配特定荧光团或荧光蛋白的光谱。

目前有的仪器方案会采用把滤镜安装在转轮(称为滤镜转盘)上。滤镜转盘使您可以混合搭配尽可能匹配所需要的激发和发射波长。

方便观察捕获到希望从结合靶标的荧光基团束上捕获的光信号,同时屏蔽掉系统其他部分的影响光线(如:环境光、激发光源等)。在荧光显微镜检测仪上不想要的光线被称为背景荧光,一款好的PCR荧光分析通道滤镜在临床诊断上仪器的稳定性和检测准确性、检測灵度当然是首选的指标,在科研上荧光定量PCR其意义在于对后续研究的指导性,数据越准确,对后续研究的指导性就越高。结果偏差越大的仪器反而会误导用户。

纳宏光电生产的滤镜由国际先进真空镀膜机生产,荧光滤镜具有很高的信噪比,背景达到10-5-10-6,激发滤镜及发射滤镜隔离度高,光谱特性稳定。

实时荧光定量PCR滤镜产品涉及应用:荧光定量RT-PCR检测仪,荧光显微镜,流式细胞仪,红外测温仪,红外热成像仪,天文学应用,无人驾驶,机器视觉,医疗生物检测仪,水质检测系统,3D成像,激光测量等各类的光学器件。

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